武汉年轮生命科技有限公司

U-87MG人神经胶质瘤贴壁细胞

【细胞货号】 C3028

"选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。

瓶装血清一定要逐步解冻: 4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀小心勿造成气泡,使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃ 解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。

热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,U-87MG人神经胶质瘤贴壁细胞待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清包括不同批次对细胞的影响。【细胞缩写】" U-87MG细胞

【细胞名称】 U-87MG(人神经胶质瘤细胞)

【背景资料】 这是1966年至1969年间和同事从恶性神经胶质瘤中构建的细胞株中的一株(其它包括ATCCHTB-15,ATCCHTB-16andATCCHTB-17)。1975九月消除了支原体污染。

【细胞来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系

【代次】 P4

【规格】 复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管(两支)

"细胞冻存及复苏基本知识普及:

细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。

除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜DMSO,可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。 

采用""慢冻快融""的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内-196℃。【细胞数】" 110(6)

【生物安全级别】 1

【生物体】 人

【组织来源】 神经胶质瘤

【细胞形态】 上皮细胞样

【细胞特性】 贴壁

【细胞活力】 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

【细胞检测】 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

"细胞常规培养传代流程请严格遵照无菌操作

1、吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞注意把握消化时间,通常控制在1-2min

2、镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时不建议消化到细胞漂浮去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散

3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养

4、注意培养基PH值变化情况,定期换液每周2-3次,待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存

特别注意:如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养

1、收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,原瓶培养基的继续使用时间长不宜超过72小时

2、贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养

3、如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。【培养条件】" 详见细胞说明书

【传代方法】 建议1:2-1:3 两天换液一次

【冻存条件】 详见细胞说明书

【主要文献】 请具体查阅相关发表文章

公司主营ATCC、DSMZ、RIKEN、ScienCell、INCELL、Promocell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学来源细胞系及原代细胞,全程提供细胞系背景、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件、传代方法等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!

美国ATCC细胞库部分细胞:

CCD-18Co正常人结肠组织细胞、U-87MG人神经胶质瘤贴壁细胞MOVAS小鼠主动脉血管平滑肌细胞、FHC人正常结直肠粘膜细胞、Hep G2人肝癌细胞、AN3 CA人子宫内膜腺癌细胞、LNCaP clone FGC前列腺癌细胞、RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞、Hepa 1-6小鼠肝癌细胞、CHO/dhFr-中国仓鼠肾细胞(二氢叶酸还原酶缺陷型)、KB人口腔表皮样癌细胞、HEp-2人喉表皮样癌细胞、FaDu人咽鳞癌细胞、HS-746T人胃癌细胞系、AGS人胃腺癌细胞、NCI-N87人胃腺癌细胞、CACO-2人结肠癌细胞、HCT-8人结肠腺癌细胞、HT-29人结肠腺癌细胞、HuTu-80人十二指肠腺癌细胞、SW480人结肠癌细胞(限于页面篇幅,更多细胞请咨询我们)

德国DSMZ细胞库部分细胞:

CX-1人大肠癌细胞、COLO-206F人结肠癌细胞、COLO-678人结肠癌细胞、LCLC-103H人大细胞肺癌、LOU-NH91人肺癌鳞癌细胞、COLO-699人肺癌腺癌细胞、L-363人多发性骨髓瘤细胞、MOLM-16人骨髓白血病细胞、AMO-1人骨髓浆细胞瘤、OCI-LY3人B细胞淋巴瘤、KARPAS299人间变性大细胞淋巴瘤细胞株、MBT-2人膀胱癌细胞、CAL-148人乳腺癌细胞、COLO-824人乳腺癌细胞、EFM-192A人乳腺癌细胞、EFM-192B人乳腺癌细胞、EFM-192C人乳腺癌细胞、EVSA-T人乳腺癌细胞、HDQ-P1人乳腺癌细胞、JIMT-1人乳腺癌细胞(限于页面篇幅,更多细胞请咨询我们)

日本RIKEN细胞库部分细胞:

MH7A类风湿关节炎滑膜成纤维细胞、HPB-ALL白血病细胞、MRMT-1大鼠乳腺癌细胞、RERF-LC-AI人肺癌细胞、KE-39人胃癌细胞(限于页面篇幅,更多细胞请咨询我们)

美国ScienCell细胞库部分细胞:

HPMEC人肺微血管内皮原代细胞、HAEC人肺大动脉内皮原代细胞、HPASMC人肺大动脉平滑肌原代细胞、HPVEC人肺大静脉内皮原代细胞、HPVSMC人肺大静脉平滑肌原代细胞、HPAAF人肺动脉成纤维原代细胞、HPAEpiC人肺泡上皮原代细胞、HTEpiC人气管上皮原代细胞、HBEpiC人支气管上皮原代细胞、HPSAEpiC人小气道上皮原代细胞、HPF人肺成纤维原代细胞、HBSMC人支气管平滑肌原代细胞、HSASMC人小气道平滑肌原代细胞、HTSMC人气管平滑肌原代细胞、HBF人支气管成纤维原代细胞、HMEpiC人乳腺上皮原代细胞、HMF人乳腺成纤维原代细胞、HPrEpiC人前列腺上皮原代细胞、HPIC人胰岛原代细胞、HPSMC人前列腺平滑肌原代细胞(限于页面篇幅,更多细胞请咨询我们)

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C0482 HepA1-6|小鼠肝癌细胞 ,公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、细胞系、癌细胞系(三千多种),提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!

C0648 HuT78|人T淋巴细胞白血病细胞 ,公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、细胞系、癌细胞系(三千多种),提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!

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C0798 LS180|人结肠腺癌细胞 ,公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、细胞系、癌细胞系(三千多种),提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!